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ELISA试剂盒实验的注意事项

发布日期:2019-09-02 作者: 点击:

我们在每次做一个实验肯定都是小心翼翼,蹑手蹑脚的,生怕出现什么意外,下面上海恒远生物科技有限公司教您在做实验的时候该注意的地方。

    注意事项有:

    1.仔细阅读说明书

    2.检查试剂盒标签上的有效使用期,如果超过了有效使用期那就请勿使用了。

    3.按照说明书上准备所有的试剂

    4.标本制备的规范,每个标本体积要按照2-3个复孔以上的量制备和储存,尽量分装做备份,短期内无法实验者,注意低温保存

    5.准备好所有实验中额外的所需品,比如(移液器,试管,清洗器,酶标仪)

    6.按说明书将所用试剂平衡至室温,根据检测标本数量确定所需试剂的量

    7.检查试剂盒内每种试剂的贮存条件,保证所有试剂均按照试剂盒内说明书推荐的条件存储。进口试剂

    8.检查不稳定或者变质的试剂溶液(比如沉淀或变色)。有些试剂,比如标准品稀释液或者检
测稀释液,可能在设计时就含有沉淀物。所有试剂在滴入酶标板之前,必需充分混匀。而由于沉淀物的特性,在加入酶标板之前,必需不停搅拌。

    9.保证充分的孵育时间和温度。

    10.在混合或溶解蛋白溶液时,避免泡沫产生。

    11.在实验开始之前,安排好实验流程,清洁工作台。

ELISA捕获包被法检测抗体原理及其简单步骤

做实验的时候你知道ELISA捕获包被法检测抗体原理和步骤吗,
    一、原理
    捕获包被法(亦称反向间接法)ELISA,主要用于血清中某种抗体亚型成分(如IgM)的测定。以目前最常用的IgM测定为例,因血清中针对某种抗原的特异性IgM和IgG同时存在,则后者可干扰IgM的测定。因此先将所有血清IgM(包括异性IgM和非特异性IgM)固定在固相上,在去除IgG后再测定特异性IgM。IgM抗体的检测用于传染病的早期诊断中。先用抗人IgM抗体包被固相,以捕获血清标本中的IgM(其中包括针对抗原的特异性IgM抗体和非特异性的IgM)。然后加入抗原,此抗原仅与特异性IgM相结合。继而加酶标记针对抗原的特异性抗体。再与底物作用,呈色即与标本中的IgM成正相关。此法常用于病毒性感染的早期诊断。类风湿因子(RF)同样能干扰捕获包被法测定IgM抗体,导致假阳性反应。因此中和IgG的间接法近来颇受青睐,用这类试剂检测抗CMV IgGM和抗弓形虫IgM抗体已获成功。进口试剂进口试剂

    捕获法测抗体的简要操作步骤:
   1.特异性捕获抗体的包被,先把能特异性结合待测抗原的抗体固定于固相载体表面;

   2.加入待测样品,通过固定在载体表面的针对该抗原的抗体固定于载体表面;

   3.加入特异性抗原以及针对该特异性抗原的酶标抗体;

   4.加入酶促反应底物,发生显色反应,显色的深浅与待测抗体的量成正比。进口试剂



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